生物潔凈室無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)是采用微生物培養(yǎng)基代替產(chǎn)品對(duì)無(wú)菌工藝進(jìn)行評(píng)估的驗(yàn)證技術(shù)。無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)也被稱為培養(yǎng)基灌裝或培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)，通常需要將培養(yǎng)基暴露于設(shè)備、容器密封系統(tǒng)的表面和關(guān)鍵環(huán)境條件中，并模擬實(shí)際生產(chǎn)完成工藝操作。然后將裝有培養(yǎng)基的密封容器進(jìn)行培養(yǎng)以檢查微生物的生長(zhǎng)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，以確定實(shí)際生產(chǎn)中產(chǎn)品被污染的概率。

　　培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)需要模擬整個(gè)工藝過(guò)程，包括從部件、材料的滅菌準(zhǔn)備，配制混合，無(wú)菌過(guò)濾，灌裝，一直到完成容器密封的整個(gè)過(guò)程。培養(yǎng)基灌裝是用于評(píng)估整個(gè)無(wú)菌工藝過(guò)程，用以表明如果嚴(yán)格按照工藝要求生產(chǎn)，產(chǎn)品的無(wú)菌性有可靠保證；但須承認(rèn)，不管模擬試驗(yàn)還是實(shí)際生產(chǎn)總是存在差異的，因此不能將培養(yǎng)基灌裝結(jié)果與實(shí)際生產(chǎn)中的污染概率等同起來(lái)，即使獲得很好的培養(yǎng)基灌裝結(jié)果，也不能排除實(shí)際生產(chǎn)發(fā)生污染的可能性。

　　培養(yǎng)基灌裝應(yīng)在實(shí)際生產(chǎn)相同的條件(環(huán)境、設(shè)備等)下盡量模擬實(shí)際生產(chǎn)完成操作。應(yīng)充分考慮生產(chǎn)時(shí)可能造成污染的各種因素，應(yīng)對(duì)常規(guī)生產(chǎn)中的各種干擾活動(dòng)進(jìn)行模擬，應(yīng)模擬常規(guī)生產(chǎn)可能遇到的較差條件狀況下的操作。

　　1.生物潔凈室培養(yǎng)基灌裝技術(shù)

　　培養(yǎng)基的選擇和處理，培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)頻率，生產(chǎn)線較長(zhǎng)允許運(yùn)行時(shí)間(長(zhǎng)時(shí)間生產(chǎn)可能導(dǎo)致污染增加)，班次更換、暫停及必要的更衣，灌裝批次量，生產(chǎn)線的運(yùn)行速度及設(shè)置，實(shí)際生產(chǎn)可能出現(xiàn)的正常干擾次數(shù)、類型及復(fù)雜程度，以及非常規(guī)的干擾和活動(dòng)(如設(shè)備維修、中斷、設(shè)備的各種調(diào)整)，環(huán)境監(jiān)測(cè)方案和取樣操作，關(guān)鍵區(qū)域內(nèi)較多可容納的總?cè)藬?shù)及人員可能的活動(dòng)，容器的密封系統(tǒng)(如規(guī)格、大小、類型、對(duì)設(shè)備的兼容性)，無(wú)菌條件下的運(yùn)輸、轉(zhuǎn)移次數(shù)(如容器轉(zhuǎn)移、加膠塞、加無(wú)菌原輔材料)，只有經(jīng)過(guò)培養(yǎng)基灌裝的人員才能參與實(shí)際無(wú)菌生產(chǎn)，培養(yǎng)基灌裝后應(yīng)隨即對(duì)生產(chǎn)設(shè)施和設(shè)備清洗和滅菌，避免殘留培養(yǎng)基造成污染。

　　2.生物潔凈室培養(yǎng)基灌裝培養(yǎng)基的選擇

　　胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基(TSB)是一種廣譜性培養(yǎng)基，特別對(duì)無(wú)菌工藝環(huán)境中源自人體的細(xì)菌、芽孢和真菌有良好的促生長(zhǎng)效果，是無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)常用的培養(yǎng)基。如果產(chǎn)品需充入惰性氣體、儲(chǔ)存在無(wú)氧條件，無(wú)菌操作在嚴(yán)格的厭氧環(huán)境(即氧氣濃度低于0.1%)中進(jìn)行時(shí)，應(yīng)評(píng)估是否采用厭氧培養(yǎng)基。在厭氧的無(wú)菌工藝環(huán)境監(jiān)控中反復(fù)發(fā)現(xiàn)厭氧微生物或在產(chǎn)品無(wú)菌檢查中發(fā)現(xiàn)厭氧微生物時(shí)，需評(píng)估增加厭氧培養(yǎng)基。用于模擬抑菌性產(chǎn)品的培養(yǎng)基，如有必要需評(píng)估抑菌性產(chǎn)品對(duì)其促生長(zhǎng)能力及模擬試驗(yàn)結(jié)果的影響。促生長(zhǎng)試驗(yàn)的指示菌除了相關(guān)規(guī)定以外，還應(yīng)考慮使用環(huán)境監(jiān)控和無(wú)菌檢查中的分離菌，以代表實(shí)際生產(chǎn)中的可能遇到的污染菌，促菌生長(zhǎng)試驗(yàn)的接種量應(yīng)不超過(guò)100CFU。